HLA-B27檢測雙色試劑(流式細(xì)胞法)

HLA-B27檢測雙色試劑

HLA-B27檢測雙色試劑由HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE雙色試劑（流式細(xì)胞法）和IgG2a-FITC/IgG1-PE雙色同型對(duì)照（流式細(xì)胞法）組成，后者使用與前者相應(yīng)單克隆抗體亞型一致的免疫球蛋白，和樣本反應(yīng)時(shí)，與前者有著相同的非特異性結(jié)合水平，但是與相應(yīng)抗原無特異性的反應(yīng)。作為對(duì)照試劑，可以排除前者試劑中單克隆抗體與樣本的非特異性反應(yīng)，從而提高檢測的準(zhǔn)確度。

人外周血細(xì)胞與該雙色試劑避光孵育反應(yīng)，熒光素偶聯(lián)抗體與白細(xì)胞表面特異性抗原結(jié)合。采用溶血/洗滌的方式處理反應(yīng)樣本，最后將處理后的樣本在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測。由于不同細(xì)胞抗原表達(dá)量不同，其結(jié)合的熒光素偶聯(lián)抗體的數(shù)量會(huì)有差異，該樣本液通過流動(dòng)室時(shí)在激光照射下會(huì)被激發(fā)出不同發(fā)射波長的熒光，流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞的前向角散射光（FSC）、側(cè)向角散射光（SSC）和熒光信號(hào)進(jìn)行收集，根據(jù)樣本細(xì)胞檢測的前向角散射光、側(cè)向角散射光和熒光強(qiáng)度等參數(shù)信息，對(duì)HLA-B27陰陽性結(jié)果進(jìn)行判定。此外，該試劑采用HLA-B27 /HLA-B7雙抗體策略，可以有效降低HLA-B7抗原帶來HLA-B27檢測假陽性的干擾，進(jìn)一步提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。